Метод ПЛР

Метод ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) - «золотий стандарт» сучасної ДНК - діагностики, високочутливий метод молекулярної біології. Метод ПЛР використовується в медицині, генетиці, криміналістики та інших областях. Він часто і успішно застосовується в діагностиці багатьох інфекційних захворювань.

Діагностика інфекційних захворювань методом ПЛР

Дослідження методом ПЛР дозволяє виявити в досліджуваному матеріалі не тільки самого збудника, але навіть єдиний фрагмент чужорідної ДНК. Досліджуваним (біологічним) матеріалом виступає: венозна кров, епітеліальні клітки і секрет статевих шляхів, сперма, слина, мокротиння та інші біологічні виділення. Необхідний біологічний матеріал визначається передбачуваним захворюванням.
Метод ПЛР в наш час, безумовно, є потужним діагностичним інструментом. Мабуть, єдиним мінусом дослідження є його висока ціна.
В переліку захворювань, наявність яких можна визначити методом ПЛР присутні:

вірусні та бактеріальні пневмонії;

туберкульоз;

кір, краснуха, паротит;

інфекційні гепатити всіх форм;

сальмонельоз, дифтерія;

хелікобактеріоз та захворювання, викликані кишковими інфекціями;

ЗПСШ (захворювання, що передаються статевим шляхом): гонорея, хламідіоз, уреаплазмоз, сифіліс, СНІД, генітальний герпес, гарднерельоз та інші.

Обстеження на ІПСШ методом ПЛР

На відміну від традиційних аналізів методика ПЛР дозволяє виявити інфекції що передаються статевим шляхом (ІПСШ) навіть при повній відсутності їх ознак. Для забору біологічного матеріалу жінкам роблять зіскрібок епітеліальних клітин каналу шийки матки, чоловікам - зішкріб уретри. При необхідності методом ПЛР проводиться дослідження венозної крові.
Таким чином, обстеження на ІПСШ методом ПЛР дає можливість виявити:

вірус імунодефіциту людини (ВІЛ);

бліду трепонем (збудника сифілісу);

вірус простого герпесу та цитомегаловірус;

вірус папіломи людини (ВПЛ);

хламідії, токсоплазму, мікоплазми, уреаплазми та інші статеві інфекції.

За умови правильності проведення аналізу методом ПЛР ймовірність хибнопозитивних результатів виключається.
Окремо слід згадати про вірус папіломи людини (ВПЛ) і про значення методу ПЛР для його діагностики. На відміну від онкоцитологического мазка методом ПЛР можна визначити конкретний тип ВПЛ, зокрема його онкогенні типи 16 і 18 наявність яких загрожує жінці таким серйозним і часто смертельним захворюванням, як рак шийки матки . Своєчасне виявлення онкогенних типів ВПЛ методом ПЛР нерідко дає можливість запобігти розвитку цервікального раку.

Імуноферментний аналіз (ІФА) та метод полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР): плюси і мінуси

Який діагностичний метод краще: ПЛР або ІФА? Правильної відповіді на це питання не існує, так як по суті своїй діагностика з допомогою цих двох досліджень переслідує різні цілі. Причому частіше методи ІФА і ПЛР застосовуються в комплексі.
Дослідження методом ПЛР необхідно для визначення конкретного збудника інфекції, виявити його можна відразу після зараження, незважаючи на відсутність симптоматичного прояви захворювання. Такий метод ідеальний для виявлення прихованих і хронічних бактеріальних та вірусних інфекцій. З його допомогою можна виявити одночасно кілька збудників, а під час терапії метод ПЛР дозволяє оцінити її якість за рахунок визначення кількості копій чужорідної ДНК.
На відміну від методики ПЛР метод ІФА покликаний виявити не самого збудника інфекції, а імунна відповідь організму на нього, тобто виявити наявність і кількість антитіл до певного збудника. В залежності від типу виявлених антитіл (IgM, ІдА, IgG) можна визначити стадію розвитку інфекційного процесу.
Обидва методу ПЛР та ІФА володіють високою достовірністю (100 і 90% відповідно). Але важливо відзначити той факт, що аналіз ІФА в деяких випадках дає хибнопозитивний (якщо людина перехворіла певним захворюванням в минулому) або псевдонегативний (якщо зараження відбулося відносно недавно) результат.